Análisis de los complejos multiproteínicos de Bifidobacterium longum por Electroforesisi Blue Native de doble dimensión, efecto del sustrato.

Abstract

"Bifidobacterium longum es una de las especies bacterianas nativas de la flora intestinal, conocida como probiótica; es decir , que proporciona beneficios a la salud del huésped. En el intestino los probióticos consumen preferentemente azúcares no digeribles por el huésped como los fructanos que se encuentran en las plantas y son conocidos como prebióticos. El estudio del complexoma (todos los complejos de proteínas de la célula), ayuda a tener una mejor comprensión y una visión global de la función celular. La doble-dimensión Blue Native (BN)/SDSPAGE fue inicialmente reportada para analizar complejos de proteínas de membrana. En el presente trabajo hemos aplicado la técnica BN/SDS-PAGE para caracterizar los complejos citoplásmicos en B. longum, cepa ATCC 15707 y sus cambios cuando se tiene como fuente de carbono glucosa o fructanos. Para ello se optimizó la electroforesis BN y el usó de tricina en lugar de glicina mejoró la separación. Fue posible identificar 53 proteínas agrupadas en 8 complejos, además de identificar las proteínas expresadas diferencialmente en las diferentes fuentes de carbono. Las proteínas componentes de los complejos fueron identificadas por espectrometría de masas."

"Bifidobacterium longum is one of the bacterial species native of the intestinal flora, it is known as a probiotic, i.e. bacteria that provide health benefits to the host. In the intestine, the probiotics consume indigestible sugars preferentially by the host as fructans found in plants and are known as prebiotics. The study of the complexoma interest (all protein complexes in the cell), is helps in the understanding and to have a overview of cellular function. The two-dimensional Blue Native BN/SDS-PAGE was initially reported for analysis of membrane protein complexes. In this study we assessed the study of cytoplasmic protein that form complexes in B. longum ATCC 15707 in the presences of fructans as a carbon source by this method. BN electrophoresis was improved by using tricine instead of glycine. It was possible to identify 53 proteins grouped into eight complexes, and identify differentially expressed proteins in different carbon sources. The protein components of the complex were identified by mass spectrometry."