Expresión de los canales TRPV en líneas celulares preadipocíticas 3T3. El papel de TRPV1 en la antiadipogénesis por capsaicinoides.

Abstract

"Aunque se ha propuesto que el receptor-canal TRPV1 media la antiadipogénesis por capsaicinoides, los preadipocitos múridos 3T3-F442A, sensibles a capsaicina, no parecen expresar este receptor. Para estudiar el papel de los canales TRPV en células adiposas, analizamos la expresión de los genes Trpv1, Trpv2, Trpv4, Trpv5 y Trpv6 en las líneas celulares preadipocíticas 3T3-L1, 3T3-F442A y 3T3-F442A/C4. Mediante RT-PCR detectamos los mensajeros de Trpv1 y Trpv2 en preadipocitos y adipocitos 3T3-L1 y para Trpv4 sólo en adipocitos. 3T3-F442A, por su parte, no expresó el mensajero de Trpv1 pero sí el de Trpv2 y Trpv4 en preadipocitos y adipocitos. Las células 3T3- F442A/C4 expresaron los mensajeros de Trpv1 y de Trpv4 en los dos estados de diferenciación y el de Trpv2 sólo en adipocitos. Ninguna de las líneas celulares expresó los mRNAs de Trpv5 ó Trpv6. Por Western blot confirmamos la presencia de TRPV1 y TRPV4 en preadipocitos y adipocitos 3T3-L1 y de TRPV2 en adipocitos de esta línea celular. Asimismo, confirmamos la ausencia de TRPV1 y la presencia de TRPV4 en ambos estados de diferenciación de 3T3- F442A y de TRPV2 en el estado adiposo de esta línea. También detectamos TRPV1 en preadipocitos 3T3-F442A/C4 aunque no logramos confirmar la presencia de la proteína TRPV2 en éstas células, que sí expresaron TRPV4 en ambos estados de diferenciación. Por otro lado, capsaicinoides naturales (capsaicina y resiniferatoxina) y sintéticos (C8 y C9) bloquearon de manera similar la adipogénesis de 3T3-L1 y 3T3-F442A. Nuestros resultados sugieren que TRPV1 es dispensable en la antiadipogénesis por capsaicinoides y que TRPV2 y TRPV4 pueden jugar un papel en el metabolismo y desarrollo del tejido adiposo."

"Although it has been proposed that TRPV1 mediates the antiadipogenesis by capsaicinoids, the capsaicinoid-sensitive 3T3-F442A preadipocytes does not seem to express this receptor-channel. To study the role of TRPV channels in adipose cells, we analyzed the expression of Trpv1, Trpv2, Trpv4, Trpv5 and Trpv6 in 3T3-L1, 3T3-F442A and 3T3-F442A/C4 preadipose cell lines. By RTPCR we detected mRNA from Trpv1 and Trpv2 in 3T3-L1 preadipocytes and adipocytes and mRNA from Trpv4 in the adipose stage. 3T3-F442A did not express Trpv1, but it expressed Trpv2 and Trpv4 in both differentiation forms. 3T3-F442A/C4 cells expressed Trpv1 and Trpv4 in both differentiation stages and Trpv4 only in the adipose stage. None of these cell lines expressed Trpv5 or Trpv6. By Western blot analyses we confirmed the presence of TRPV1 and TRPV4 in both differentiation forms of 3T3-L1, and TRPV2 only in the adipose stage. 3T3/F442A cells did not express TRPV1 but they expressed TRPV2 in adipocytes and TRPV4 in both differentiation stages. We also detected TRPV1 and TRPV4 proteins in both differentiation forms of 3T3-F442A/C4, but we couldn’t confirm the TRPV2 presence in these cells. On the other hand, both natural (capsaicin and resiniferatoxin) or synthetic (C8 and C9) capsaicinoids similarly blocked 3T3-L1 and 3T3-F442A adipogenesis. Our results suggest that TRPV1 is dispensable for the antiadipogenesis by capsaicinoids and that TRPV2 and TRPV4 could play a role in adipose tissue development and metabolism."