Heterogeneidad en la expresión de adhesinas y polimorfismos de SIR3 en una colección de aislados clínicos de Candida glabrata.

Abstract

"Candida glabrata ha surgido recientemente como la segunda causa más común de candidiasis invasiva en pacientes inmunocomprometidos, después de Candida albicans. La capacidad de adhesión de varias especies de Candida es importante para la colonización de mucosas. Bajo ciertas condiciones in vitro, la cepa de Candida glabrata (BG14) que estudiamos en el laboratorio, se adhiere a células epiteliales y endoteliales mediante las proteínas de pared celular Epa1, Epa6 y Epa7 (adhesinas epiteliales), codificadas por los genes EPA. Estos genes forman una familia de genes (de 17 a 23 según la cepa), la mayoría de los cuales se encuentran en regiones cercanas a los telómeros, y son regulados negativamente por las proteínas de la maquinaria del silenciamiento subtelomérico: Sir2, Sir3, Sir4, yKu70, yKu80, Rap1 y Rif1. En este trabajo caracterizamos la capacidad de adhesión a células epiteliales, o a superficies de plástico, de una colección de 79 aislados clínicos de C. glabrata, de diferentes orígenes. Once de ellos mostraron ser hiper-adherentes a células HeLa en condiciones en las que la cepa BG14 no se adhiere; sin embargo, casi todos tienen una capacidad de adherencia similar y uno de ellos mucha menor capacidad de formación de biofilms sobre superficies de plástico. La mayoría de los aislados hiperadherentes sobreexpresan uno o varios de los genes EPA.. En este trabajo amplificamos y secuenciamos los genes HDF1 y SIR3 de varios aislados hiperadherentes. Los datos muestran que el gen SIR3 de los aislados hiperadherentes tiene varios polimorfismos (silenciosos y/o con cambio de aminoácido) con respecto a la cepa BG14 y algunos de estos se localizan flanqueando regiones que en la proteína Sir3 de Saccharomyces cerevisiae son necesarias para el silenciamiento."

"Candida glabrata has recently emerged as the second cause of candidiasis in immunocompromised patients after Candida albicans. Adherence to epithelial cells by Candida species is thought to be important for colonization of mucosal tissue. This adherence is mainly mediated by the cell wall proteins Epa1, Epa6 and Epa7 (called epithelial adhesins), encoded by the corresponding EPA genes. The EPA gene family is composed of 17 to 23 genes (depending on the strain), the majority of which are localized close to the telomeres and are negatively regulated by the silencing proteins Sir2, Sir3, Sir4, yKu70, yKu80, Rap1 and Rif1. In strain BG14, the majority of the EPA genes are not expressed in vitro due to subtelomeric silencing. In this work we characterized the ability to adhere to epithelial cells or plastic surfaces of a collection of 79 C. glabrata clinical isolates from different origins. Eleven of these are hyperadherent to HeLa cells under conditions in which strain BG14 is non-adherent. However, almost all of the hyperadherent isolates display the same ability to form biofilms on plastic surfaces. The majority of the hyperadherent isolates overexpress one or several of the EPA genes analyzed although each one presents a different expression pattern and there is no direct correlation between EPA gene expression and the adherence to plastic or epithelial cells. In this work we amplified and sequenced HDF1 and SIR3 of some hyperadherent clinical isolates. Our data show that the SIR3 gene of these isolates contain several polymorphisms respect to strain BG14, and some of these changes are localized at positions that flank regions required for silencing in the Sir3 protein of Saccharomyces cerevisiae."