Caracterización de cepas de Candida glabrata que expresan simultáneamente los genes a1 y alfa2 ó a1 y alfa3.

Abstract

"Candida glabrata es un hongo asexual, patógeno de humanos que tiene una relación filogenética cercana con Saccharomyces cerevisiae, un hongo sexual, no patógeno que a otros hongos de su mismo género. C. glabrata contiene tres loci de apareamiento llamados MTL. El locus MTL1 (que puede contener información tipo a o alfa) y el locus MTL2 (con información tipo a) son transcripcionalmente activos mientras que MTL3 (con información tipo alfa), presenta un silenciamiento incompleto. En el laboratorio encontramos que el gen alfa2 presente en el locus MTL3 (denominado alfa3) es una variante más larga del gen alfa2 que se encuentra en el locus MTL1. En células de S. cerevisiae que expresan simultáneamente información a y alfa, las proteínas a1 y alfa2 forman un heterodímero que reprime varios genes del ciclo sexual y de respuesta a estrés osmótico. En C. glabrata podría formarse un heterodímero en cepas que contienen información a en MTL1 y alfa en MTL3. En este trabajo implementamos la técnica de complementación bimolecular para investigar si se forman los heterodímeros a1/alfa2 ó a1/alfa3. Construimos cepas que expresan simultáneamente los genes a1 y alfa2 o bien a1 y alfa3, y encontramos que estas crecen más lentamente en medio líquido con NaCl, que las cepas que solo expresan un tipo de información o ninguna. PALABRAS CLAVE: C. glabrata, loci MTL, complementación bimolecular por fluorescencia (BiFC)."

"Candida glabrata is an asexual human pathogen, closely related to Saccharomyces cerevisiae, a non-pathogenic sexual fungus. C. glabrata contains three mating type-like loci called MTL. MTL1 (which can contain information type a or alpha), and MTL2 (type a information) are transcriptionally active while MTL3 (type alpha information) is repressed by silencing although not completely. We have found that the alpha2 gene present at the MTL3 locus is a longer variant, called alpha3, of the alpha2 gene present at MTL1. In S. cerevisiae cells that express both types of information, the proteins a1 and alpha2 form a heterodimer that represses several mating genes and genes involved in the response to osmotic stress. In C. glabrata cells an analogous heterodimer could be formed in cells that contain a-type information in MTL1 and alpha-type information in MTL3. In this work we implemented the Bimolecular Fluorescence Complementation technique to determine whether the heterodimers a1-alfa2 or a1-alfa3 can be formed in C. glabrata. We also constructed strains that simultaneously express a1 and alfa2 or a1 and alfa3 genes and found that these strains grow more slowly in liquid media with NaCl than strains that contain only one type, or no mating information."