La apertura de los canales activados por ligando no es independiente

Abstract

"Inhibitory interactions between GABAA (activated by GABA) and P2X (activated by ATP) or 5-HT3 (activated by serotonin) receptors of myenteric neurons from the guinea pig small intestine were characterized using whole-cell recordings. Currents induced by GABA (IGABA) were inhibited by picrotoxin or bicuculline, those induced by ATP (IATP) were inhibited by PPADS (a P2X receptor antagonist) and a high concentration of Ca2+, whereas those induced by serotonin (I5-HT) were inhibited by tropisetron. Currents induced by GABA+ATP (IGABA+ATP) or by GABA+5HT (IGABA+5-HT) were smaller than the addition of the individual currents, revealing current occlusion. This occlusion requires maximal activation of at least one of these receptors. Kinetic and pharmacological properties of IGABA+ATP or IGABA+5-HT indicate that they are carried through both GABAA and P2X channels or GABAA and 5-HT channels, respectively. ATP (or 5-HT) did not affect IGABA in neurons in which: i) P2X (or 5-HT3) channels were not present, ii) after inhibiting P2X channels with Ca2+, iii) in the presence of PPADS (or in the presence of tropisetron), iv) after P2X (or 5-HT3) receptor desensitisation, or v) at IATP reversal potential. Similarly, GABA did not affect P2X (or 5-HT3) mediated currents in neurons in which: i) GABAA channels were not present, ii) in the presence of picrotoxin or bicuculline, GABAA receptor antagonists, iii) after GABAA receptor desensitisation, or iv) at the IGABA reversal potential. Current occlusion occurred as fast as current activation. It was still present in the absence of Ca2+, when experiments were performed at low temperature (11ºC), after adding to the pipette solution a cocktail of protein kinase inhibitors (staurosporine, genistein or K-252a), after substituting the GTP in the pipette with GDP-β-S, and after treating the cells with N-ethylmaleimide. These results are consistent with a model of cross-inhibition between GABAA and P2X and between GABAA and 5-HT3 receptors."

"La interacciones inhibidoras entre los canales GABAA (activados por GABA) y P2X (activados por ATP) o 5-HT3 (activados por serotonina) en neuronas mientéricas del intestino delgado del cobayo fueron caracterizadas utilizando registros de célula completa. Las corrientes inducidas por GABA (IGABA) fueron inhibidas por picrotoxina o bicuculina, aquellas inducidas por ATP (IATP) fueron inhibidas por PPADS (un antagonista de los receptores P2X) y por una concentración alta de Ca2+, mientras que, aquellas inducidas por serotonina (I5-HT) fueron inhibidas por tropisetron. Las corrientes inducidas por GABA+ATP (IGABA+ATP) o por GABA+5HT (IGABA+5-HT) fueron menores que la suma de las corrientes individuales, revelando una oclusión de las corrientes. Esta oclusión requiere de la activación máxima de al menos uno de los receptores. Las características cinéticas y farmacológicas de IGABA+ATP o IGABA+5-HT indican que estas son mediadas por canales GABAA y P2X o por canales GABAA y 5-HT3, respectivamente. El ATP (o la 5-HT) no afectó IGABA en neuronas en las cuales: i) los canales P2X (o los 5-HT3) no estaban presentes, ii) después de inhibir los canales P2X con Ca2+, iii) en presencia del PPADS (o en presencia del tropisetron), iv) después de desensibilizar los receptores P2X (o los 5-HT3), o v) en el potencial de inversión de la IATP. De manera similar, el GABA no afectó las corrientes mediadas por los canales P2X (o por los 5-HT3) en neuronas en las cuales: i) los canales GABAA no estaban presentes, ii) en presencia de picrotoxina o bicuculina, antagonistas de los receptores GABAA, iii) después de desensibilizar los receptores GABAA, o iv) en el potencial de inversión de la IGABA. La oclusión de la corriente ocurrió tan rápido como la activación de los receptores. Estuvo presente en ausencia del Ca2+, en experimentos a temperatura baja (11ºC), después de agregar a la solución de la pipeta varios inhibidores de las proteín-cinasas (estaurosporina, genisteina o K-252a), después de sustituir GTP por GDP-β-S en la pipeta, y después de tratar las células con Netilmaleimida. Estos resultados son consistentes con un modelo de inhibición cruzada entre los receptores GABAA y P2X, y entre los receptores GABAA y 5- HT3."