Heterologous expression of Trichoderma atroviride endochitinase ech42 in Pichia pastoris at low and high dissolved oxygen tensions

Abstract

"The expression of recombinant Trichoderma atroviride endochitinase ech42 (rech42) in Pichia pastoris driven by the constitutive PGAP promoter was tested at low (3%) and high (40%) dissolved oxygen tension (DOT) conditions. Maximum volumetric enzyme activities of 18,600±1053 and 12,330±1000 U1−1 were attained at 3% and 40% DOT, respectively. Whereas maximum specific enzyme activities were 89.4±4.6 y 88.8±4.0 U mg−1protein. We found that conjunction of low DOT and the overexpression of rech42 affected the cell size of the P. pastoris but no the rech42 specific enzyme activity."

"La expresión de la Endoquitinasa de 42 kDa de Trichoderma atroviride recombinante (rech42) en Pichia pastoris bajo la dirección del promotor constitutivo, PGAP, fue analizada a baja (3%) y alta (40%) tensión de oxígeno disuelto (TOD). Las actividades enzimáticas volumétricas máximas logradas en cada condición fueron 18,600±1053 y 12,330±1000 U 1−1, a TOD de 3% y 40%, respectivamente. Mientras que las actividades específicas máximas fueron 89.4±4.6 y 88.8±4.0 U mg−1proteína. Se encontró que la conjunción de una baja TOD y la sobreexpresión de rech42 afectó el tamaño de las células de Pichia pastoris pero no afectó la actividad enzimática específica de rech42."