Análisis transcripcional de genes de respuesta a Interferon de tipo 1 en pacientes con Aritritis Reumatoide temprana y familiares consanguíneos

Abstract

"La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune de etiología desconocida caracterizada por la presencia de autoanticuerpos de tipo IgM e IgG. Se ha observado que en sujetos sanos los autoanticuerpos, en particular contra péptidos citrulinados (ACCP), aumentan el riesgo a desarrollar AR. El riesgo es aún mayor en familiares de primer grado de pacientes con AR. Por otra parte, los genes inducidos por Interferon de tipo I predicen el éxito o fracaso de la terapia biológica, pero no se sabe si puedan predecir el desarrollo de la AR o si se relacionan con la seropositividad a ACCP. Algunos autores sugieren que la sobreexpresión de 7 genes (MXA, MXB, LY6E, ISG15, EPSTI1, RSAD2 y HERC5) se asocia con la progresión a la fase clínica temprana de AR. En este estudio evaluamos la expresión relativa de estos 7 genes en sangre periférica de sujetos en diferente estado de evolución de esta enfermedad mediante qPCR. En particular comparamos sujetos en estado preclínico y aquellos en la etapa temprana del desarrollo de AR. Se tomó sangre a 16 pacientes con AR, a 20 familiares de primer grado de pacientes con AR y a 10 sujetos sanos. Se separó el suero para medir la presencia de anticuerpos ACCP y se aisló RNA de sangre para producir cDNA. Con el cDNA de cada sujeto se cuantificaron los niveles de expresión relativa de los genes MXA, MXB, LY6E, ISG15, EPSTI1, RSAD2 y HERC5 por el método de ΔΔCt. La expresión de LY6E, ISG15 y RSAD2 estan elevados únicamente en los familiares de pacientes con AR con respecto a los sanos (p<0.05); la expresión de HERC5 se encuentra aumentada en pacientes con AR temprana con respecto a los sanos y respecto a los pacientes con AR crónica (p<0.05) y MXB solo se eleva en pacientes con ARt y familiares ACCP+ en comparación a los familiares ACCP- y sujetos sanos, respectivamente (p<0.05). Los niveles de expresión de MXB y HERC5 se relacionan con la seropositividad a ACCP y pueden predecir el desarrollo de las diferentes etapas de evolución de la AR. Por su parte LY6E, ISG15 y RSAD2 pueden predecir la evolución a una fase pre-clínica en sujetos ACCP+, pero no a la fase de enfermedad de AR temprana."

"Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune disease of unknow etiology, distinguished bye the presence of IgM and IgG autoantibodies in serum. It has been reported that the presence of autoantibodies, specially against citrullinated peptides (ACCP), in healthy subjects increase the risk to developing RA. This risk is even greater in first-degree relatives of patients with RA. The Interferon type I response genes, have been related to predict the therapeutic outcome in RA with biologic treatment, however, is not clear if can predict the development of RA or their association with in ACCP seropositivity. We sugest that overexpression of seven IFN type I response genes (MXA, MXB, LY6E, ISG15, EPSTI1, RSAD2 y HERC5) are involved in the early clinic phase progression. In this study, we evaluated the relative expression of those seven genes in periferal blood of subjects of different disease stage. In particular, compared between the preclinic stage and the early stage of RA. Whole blood samples were collected and total RNA extracted from 16 RA patients, 20 first degree relatives and 10 healthy subjects. We determined the serum levels of ACCP antibodies. The relative expression of MXA, MXB, LY6E, ISG15, EPSTI1, RSAD 2 and HERC5 was calculated by the ΔΔCt method. LY6E, ISG15 and RSAD2 is up-regulated only in the first-degree relatives of RA patients compared to healthy subjects (p<0.05); HERC5 is up-regulated in early RA compared to healthy subjects and patients with chronic RA(p<0.05); and MXB is up-regulated in patients with early RA and ACCP+ relatives compared to ACCP- relatives and healthy subjects. The expression of MXB and HERC5 seems to be related with the seropositivity to ACCP presence and might predict the development in different stages of RA. On the other hand, LY6E, ISG15 and RSAD2 are useful to predict the transition to a pre-clinical stage with ACCP+, but not to the early RA stage."