Caracterización electrofisiológica de los receptores P2X en macrófagos humanos

Abstract

"Los receptores P2X se encuentran en una amplia variedad de tejidos donde han sido involucrados en diversos procesos fisiológicos. Datos experimentales indican que los macrófagos humanos expresan los receptores P2X1, P2X4 y P2X7, sin embargo, no existen estudios que caracterizen sus propiedades electrofisiológicas en estas células. Por lo tanto, en este estudio caracterizamos las corrientes mediadas por los receptores P2X en macrófagos humanos con morfología tipo M1 y M2, utilizando la técnica de Patch Clamp utilizando la configuración de célula completa. Monocitos de voluntarios saludables fueron cultivados por 15 días para generar macrófagos, cuyas corrientes inducidas por ATP fueron registradas. La amplitud de las corrientes incremento dependiente de la concentración de ATP (0.3 a 100 ?M). La concentración del ATP requerida para inducir el 50% de la corriente máxima (EC50) fue de 3.1 ?M en la población general de macrófagos. Las corrientes registradas a concentraciones de ATP menores de 100 ?M, disminuyen rápidamente aún en presencia del agonista. Dicha desensibilización, es bien descrita por una función exponencial. A concentraciones mayores del ATP (3-5 mM) una segunda fase fue notada donde la amplitud de las corrientes se incrementa durante la exposición continua del ATP. Estos resultados junto con observaciones recientes en monocitos sugieren que los receptores P2X1 están involucrados en estas corrientes en macrófagos."

"P2X receptors are found in a wide variety of tissues were they appear to be involved in a variety of physiological processes. Experimental data indicates that human macrophages express P2X1, P2X4 and P2X7 receptors, however, there are not electrophysiological studies that characterize their properties in these cells. Therefore, the aim here was to study the currents mediated by P2X receptors in human macrophages with morphology type M1 and M2, using the whole cell configuration of the Patch Clamp techniques. Human monocytes of healthy voluntaries were cultivated for 15 days to generate macrophages, which were stimulated with ATP and their membrane currents recorded. The amplitude of these currents was increased dependently of ATP concentrations (0.3 to 100 ?M). The ATP concentration to induced half of the maximal responses (EC50) was 3.1 ?M in a general macrophage population. Currents recorded in response to lower concentrations than 100 ?M, decreased rapidly, despite, the continuous presence of the agonist. This desensitization was well fitted to an exponential function. With higher ATP concentrations (3-5 mM), a second phase was noticed when the amplitude of these currents increased during the continuous presence of ATP. These results, together with recent observations in monocites, suggest P2X1 receptores are involved in mediating these currents in macrophages."