CHARACTERIZATION OF THE RESPONSE OF Candida glabrata (Nakaseomyces glabratus) CLINICAL ISOLATES TO NEUTROPHILS

Abstract

"Las infecciones por patógenos fúngicos están aumentando debido al incremento de la población inmunocomprometida. Algunos de los patógenos fúngicos más comunes del género Candida adquieren resistencia a los antifúngicos durante los procesos de infección. N. glabratus no solo muestra una resistencia alta a los antifúngicos, sino que también tiene una susceptibilidad relativamente baja a los neutrófilos (NØ). Esto se debe, en parte, a que N. glabratus provoca una respuesta inflamatoria de baja intensidad mientras se desplaza silenciosamente dentro del huésped. Como resultado, la activación de los NØ se retrasa, lo que permite al patógeno evadir eficazmente la respuesta inmune. Dado que N. glabratus puede evadir el sistema inmune y resistir parcialmente el ataque de los NØ, evaluamos si existe una microevolución de N. glabratus cuando se expone repetidamente de manera secuencial a los NØ. Utilizamos la cepa estándar del laboratorio de N. glabratus (BG14) y dos aislados clínicos diferentes que son resistente (AN378) o susceptible (AN376) a fluconazol (FLC), el antifúngico más comúnmente usado, para exponerlos secuencialmente a NØ y, posteriormente, recuperar las células sobrevivientes. Caracterizamos varios fenotipos de las células que sobrevivieron, incluyendo la disfunción mitocondrial (fenotipo Gly-), tiempos de duplicación y supervivencia a una nueva exposición a NØ. Además, para determinar si la acetilación/desacetilación de las histonas participan en la supervivencia a los NØ, construimos mutantes en 2 acetilasas (HATs) y dos desacetilasas de histonas (HDACs) HATs y HDACs y evaluamos su supervivencia a los NØ. No observamos un aumento en la supervivencia después de tres exposiciones consecutivas a los NØ. Demostramos por primera vez que las HDACs Rpd3 y Hos2 están involucrados en la supervivencia a NØ, mientras que la HAT Gcn5 no participa en esta respuesta."

"Infections by fungal pathogens are increasing due to a rise in the immunocompromised population, some of the most commonly found fungal pathogens of the Candida genus acquire resistance to antifungals during the infection of the host. N. glabratus is characterized by a relatively low susceptibility to neutrophils (NØ), effectively evading the immune response due to the induction of a low-grade inflammatory response by silently transiting within the host, leading to a delay in neutrophil activation. Since N. glabratus can evade the immune system and partially resist NØ attack, we determined if there is microevolution of N. glabratus when serially exposed to NØ that results in mutants or epigenetic variants which confers higher survival to neutrophil. We used our standard laboratory N. glabratus strain (BG14) and two different clinical isolates of which one is resistant (AN378) and the other susceptible (AN376) to fluconazole (FLC), the most commonly used antifungal, to sequentially expose them three consecutive times to NØ. Afterwards, we recovered the surviving N. glabratus cells and tested them further for several phenotypes including mitochondrial function (Gly- phenotype), growth rates and survival to a new exposure to fresh NØ. To determine whether histone acetylation/deacetylation participates in survival to NØ, we constructed mutants of histone acetylases (HATs) and deacetylases (HDACs) and their survival to NØ was evaluated. Three passes through NØ did not increase the resistance to NØ in the N. glabratus clinical isolates or thee BG14 strain. We demonstrated for the first time that the HDACs Rpd3 and Hos2 are involved in N. glabratus survival to NØ, whereas Gcn5 is not. "