Monitoreo de Candidatus Liberibacter en cítricos y solanáceas y transformación de tomate con genes que pueden conferir resistencia al permanente de tomate.

Abstract

The citrus disease known as Yellow Dragon or Huanglongbing (HLB) is caused by the bacterium Candidatus Liberibacter spp. In Mexico, the Ca. L asiaticus species is responsible for this disease. On the other hand, in vegetable crops such as tomato, potato, and pepper, the responsible species of the disease tomato permanent is Ca. L solanacearum. In citrus, the insect vectors of the disease are Diaphorina citri and Trioza erytreae, while in solanaceous crops, it is Bactericera cockerelli. The mentioned disease is globally distributed, and to date, there is no efficient control method, causing multimillion-dollar losses. Therefore, efficient disease monitoring and the search for alternative control methods are crucial. In this study, citrus samples with HLB symptoms were collected in Cd. Fernández and Rioverde, while tomato and chili samples were taken in Villa de Arista, S.L.P. Molecular techniques based on PCR and qPCR were used for detection and quantification. Additionally, the transformation of a tomato plant was initiated with genes that may confer resistance to these diseases, such as rar1 and npr1. Out of 12 symptomatic citrus samples analyzed by conventional PCR, only 3 tested positive; however, when analyzed by qPCR, all tested positive. Out of 9 tomato samples, only 3 tested positive by PCR. The implementation of a qPCR quantification method in solanaceae, which we are developing, is still pending. Disease detection and quantification methods are important to see the efficiency of disease control methods. Tomato seedlings putatively transformed with the rar1 gene are currently in tissue culture. Future challenges with the vector carrying the bacterium under controlled conditions will allow us to know if it tolerates the disease.

La enfermedad de cítricos conocida como Dragón amarillo o Huanglongbing (HLB) es causada por la bacteria Candidatus Liberibacter spp. En el caso de México la especie Ca. L asiaticus es la responsable de esta enfermedad. Por otro lado, en el caso de las solanáceas tomate, papa, y chile, la especie responsable de la enfermedad del “permanente de tomate es Ca. L solanacearum. En cítricos los insectos vectores de la enfermedad son Diaphorina citri y Trioza erytreae, y en el caso de las solanáceas es Bactericera cockerelli. Las enfermedades mencionadas se distribuyen globalmente y a la fecha no existe un método eficiente para su control, causando pérdidas millonarias. Por lo anterior, es importante el monitoreo eficiente de la enfermedad y la búsqueda de métodos de control alternativos. En este trabajo se tomaron muestras de cítricos con sintomatología de HLB en Cd. Fernández, y Rioverde, y de tomate y chile en Villa de Arista, S.L.P. Se utilizaron técnicas moleculares basadas en PCR y qPCR para su detección y cuantificación. Además, se inició la transformación de una planta de tomate con genes que pueden conferir resistencia a estas enfermedades, como rar1 y npr1. De 12 muestras de cítricos con síntomas analizadas por PCR convencional, solo 3 dieron positivas; sin embargo, al analizarlas por qPCR todas dieron positivas. De 9 muestras de tomate solo 3 dieron positivas por PCR, pero falta implementar un método de cuantificación por qPCR en solanáceas, el cual estamos desarrollando. Los métodos de detección y cuantificación de la enfermedad son importantes para ver la eficiencia de métodos de control. Se cuenta con plántulas de tomate presuntamente transformadas con el gen rar1 en cultivo de tejidos. Futuros retos con el vector que porte la bacteria en condiciones controladas nos permitirán saber si tolera la enfermedad.