Caracterización de una cepa de preadipocitos humanos como modelo experimental para estudios de adipogénesis in vitro

Abstract

"The study of adipose tissue takes advantage of in vitro experimental models constituted by cultures of primary preadipocytes or adipose cell lines. The first ones represent with high fidelity the metabolism of the cell adipose lineage but have a limited life span and decreasing capacity when subcultivated. The second ones show an ilimited proliferative capacity but they do not necessarily have all the functional attributes of the adipose cell lineage. The most commonly used adipogenic cell lines have a murine origin and present genetic and metabolic differences withrespect to the human cells. Although human adipogenic cell lines have been described, its use is limited, and currently there is not an vitro model system widely used for the study of human adipogenesis. Here we characterize a clonal cell strain of human subcutaneous preadipocytes, PASH-4, to explore its utility as an in vitro model system for human adipogenesis. The PASH-4 cells proliferated for 30 serial subcultures, showing population doubling times of 47 h and 95 h in the 17 and 26 subculture, and a clonogenic capacity of 7% and 2% in the 15 and 25 subculture, respectively. The PASH-4 cells maintained their adipogenic capacity until the 26 subculture, expressing the early adipose molecular markers C / EBPβ and C/EBPδ even as preadipocytes. The PASH-4 cells were diploid (46XY) at least until 20 subculture. All these characteristics make the PASH-4 strain a useful model for in vitro human adipogenesis studies and a population suitable of normal human preadipocytes to generate an established cell line of human preadipocytes"

"El estudio del tejido adiposo aprovecha modelos experimentales in vitro constituidos por cultivos primarios de preadipocitos o líneas celulares adiposas. Los primeros representan con alta fidelidad el metabolismo del linaje adiposo in vivo, pero tienen un tiempo de vida limitado y una decreciente capacidad adipogénica al subcultivarse. Las segundas muestran capacidad proliferativa ilimitada pero no necesariamente poseen todos los atributos funcionales del linaje adiposo. Las líneas celulares adipogénicas más empleadas son de origen múrido pero tienen diferencias genéticas y metabólicas con las células humanas. Aunque se han descrito líneas celulares adipogénicas humanas, hasta ahora su uso es limitado y no hay un modelo in vitro de adipogénesis humana de uso generalizado. Aquí caracterizamos una cepa de preadipocitos subcutáneos humanos de naturaleza clonal, PASH-4, para explorar su utilidad como modelo in vitro de la adipogénesis humana. Las células PASH-4 proliferaron durante 30 subcultivos consecutivos mostrando tiempos de duplicación de 47 h y 95 h en los subcultivos 17 y 26, y capacidad clonogénica del 7% y 2% en los subcultivos 15 y 25, respectivamente. Las células PASH-4 mantuvieron su capacidad adipogénica aun en el subcultivo 26, expresando los marcadores adipogénicos tempranos C/EBPβ y C/EBPδ aun en preadipocitos. Las células PASH-4 fueron diploides (46XY) al menos hasta el subcultivo 20. Estas características hacen de la cepa PASH-4 un modelo útil para estudios de adipogénesis humana in vitro y una población de preadipocitos humanos normales adecuada para generar una línea establecida de preadipocitos humanos."