Abf1 es una proteína esencial y participa en el silenciamiento subtelomérico en Candida glabrata

Abstract

"Candida glabrata es un comensal de humanos capaz de causar infecciones en individuos inmunocomprometidos, y un factor importante para su virulencia es su habilidad de adherirse a las células epiteliales. Esta capacidad se debe principalmente a Epa1 codificada por el gen EPA1, que pertenece a una gran familia de genes que codifican para proteínas de pared celular. La mayoría de estos genes se encuentran en regiones subteloméricas, por lo que están sujetos a silenciamiento subtelomérico. Los genes EPA1, EPA2 y EPA3 forman un clúster en el teloméro derecho del cromosoma E (E-R). El silenciamiento subtelomérico en C. glabrata esta regulado por el complejo SIR (Sir2, Sir3 y Sir4), Rap1 y Rif1. Además, se han identificado elementos en cis que regulan de forma negativa la expresión de EPA1 independientemente del silenciamiento subtelomérico, uno de ellos es el protosilenciador Sil2126, el cual puede silenciar un gen reportero insertado a 32 Kb alejado del teloméro. En un análisis in silico, encontramos varios sitios putativos de unión para Abf1 en Sil2126 y muchas otras regiones a lo largo de la región subtelomérica del teloméro E-R. En este trabajo demostramos que la actividad de Sil2126 depende del dominio C-terminal de CgAbf1, cuando medimos el silenciamiento del gen reporter URA3 a 32 Kb de distancia del teloméro E-R. El dominio C-terminal de CgAbf1 se requiere también para silenciamiento en otros telomeros. El efecto en el silenciamiento por CgAbf1 solo se puede detectar cuando el reportero es insertado a una distancia mayor de 10 Kb del teloméro. De manera interesante, encontramos que CgAbf1 es esencial para la viabilidad celular y su sobreexpresión afecta el crecimiento de forma negativa."

"Candida glabrata is a commensal of humans capable of causing infection in immunocompromised individuals that is able to adhere to host epithelial cells, which is an important factor for its virulence. This ability is primarily mediated by the Epa1 protein encoded by EPA1 gene, which belongs to a large family of cell wall protein-encoding genes. Most of these are localized in subtelomeric regions, and are subject to subtelomeric silencing. EPA1, EPA2 and EPA3 form a cluster close to the right telomere of chromosome E (E-R). In C. glabrata the subtelomeric silencing is mediated by the SIR complex (Sir2, Sir3 and Sir4), Rap1 and Rif1. In addition, we have identified cis-acting elements that negatively regulate EPA1 expression independently of subtelomeric silencing, one of these is a protosilencer Sil2126, which can silence a reporter gene inserted 32 Kb away from this particular telomere. In an in silico analysis, we found several putative binding sites for CgAbf1 in Sil2126 and in several other regions throughout the subtelomeric region of telomere E-R. Here we describe that Sil2126 activity depends on the C-terminal domain of CgAbf1, as measured by silencing of the URA3 reporter gene 32 kb away from the telomere E-R. The C-terminal domain of CgAbf1 is also required for silencing at other telomeres. The effect in silencing of CgAbf1 can only be detected when the reporter is inserted at a distance of >10 kb from the telomere. Importantly, we show that CgAbf1 is essential for cell viability, and its overexpression affects growth negatively. Key words: Candida glabrata, Abf1, subtelomeric silencing, essential gene."